> בלוג > חדשות התעשייה

מהם הפונקציות של ערכת ELISA?

2022-12-23

ערכת ELISA מבוססת על שלב מוצק של אנטיגן או נוגדן וסימון אנזים של אנטיגן או נוגדן. האנטיגן או הנוגדן הקשורים לפני השטח של הנשא המוצק עדיין שומר על פעילותו האימונולוגית, והאנטיגן או הנוגדן המסומן באנזים שומר גם על פעילותו האימונולוגית וגם על פעילות האנזים. בזמן הקביעה, הדגימה הנבדקת (בה מודדים את הנוגדן או האנטיגן) מגיבה עם האנטיגן או הנוגדן על פני הנשא המוצק. קומפלקס האנטיגן-נוגדנים הנוצר על הנשא המוצק מופרד מחומרים אחרים בנוזל על ידי שטיפה.

מתווספים אנטיגנים או נוגדנים המסומנים באנזים, שגם הם נקשרים לנשא המוצק על ידי תגובה. בשלב זה, כמות האנזים בשלב המוצק עומדת ביחס לכמות החומר בדגימה. לאחר הוספת המצע של תגובת האנזים, הסובסטרט מזורז על ידי האנזים כדי להפוך למוצרים צבעוניים. כמות המוצר קשורה ישירות לכמות החומר הנבדק בדגימה, כך שניתן לבצע ניתוח איכותי או כמותי לפי עומק הצבע.

היעילות הקטליטית הגבוהה של אנזימים מגבירה בעקיפין את תוצאות התגובה החיסונית, מה שהופך את המבחן לרגיש מאוד. ELISA יכול לשמש לקביעת אנטיגנים, אך ניתן להשתמש גם לקביעת נוגדנים.

עקרונות בסיסיים של ערכת ELISA
הוא משתמש בתגובה ספציפית של אנטיגן ונוגדן כדי לחבר את האובייקט לאנזים, ולאחר מכן מייצר תגובת צבע בין האנזים והמצע לקביעה כמותית. מושא המדידה יכול להיות נוגדן או אנטיגן.

ישנם שלושה ריאגנטים הדרושים בשיטת קביעה זו:
â אנטיגן או נוגדן בשלב מוצק (סופח חיסון)
â¡ אנטיגן או נוגדן המסומן באנזים (סמן)
â¢ מצע לפעולת האנזים (חומר לפיתוח צבע)

במדידה, האנטיגן (נוגדן) נקשר תחילה לנשא המוצק, אך עדיין שומר על פעילותו החיסונית, ולאחר מכן מתווסף מצומד (סמן) של נוגדן (אנטיגן) ואנזים, שעדיין שומר על פעילותו החיסונית המקורית והאנזים. פעילות. כאשר המצומד מגיב עם האנטיגן (נוגדן) על הנשא המוצק, מוסיפים את המצע המתאים של האנזים. כלומר, הידרוליזה קטליטית או תגובת REDOX וצבע.

גוון הצבע שהוא מייצר פרופורציונלי לכמות האנטיגן (נוגדן) שיש למדוד. ניתן לצפות במוצר צבעוני זה בעין בלתי מזוינת, מיקרוסקופ אופטי, מיקרוסקופ אלקטרונים, ניתן למדוד גם באמצעות ספקטרופוטומטר (מכשיר תווית אנזים). השיטה פשוטה, נוחה, מהירה וספציפית.

קודם:היכרות עם צלחת אליסה

הַבָּא:מדוע תרבית תאים מבהירה תחילה תאי דם אדומים?