בחירת כלי התרבות הנכונים היא חיונית להבטחת צמיחת תאים מיטבית ותוצאות ניסוי. בבחירת כלי תרבית תאים, חשוב לקחת בחשבון גורמים כמו סוג התא, המטרה הספציפית של התרבית שלך, קנה המידה של התרבית, סוג מצע התרבית, החומרים וגודל הכלים, טיפולי פני השטח, מכסים לצורך תקין. החלפת גז, והתאימות שלהם לציוד המעבדה שלך.
להלן גורמי המפתח שיש לקחת בחשבון בעת בחירת כלי התרבות התאים הנכון
1. בחר את כלי תרבית התאים בהתאם לסוג התאים
תאים דבקים
תאים אלה צריכים משטח להיצמד אליו ולהתפשט. עבור תאים נצמדים, תזדקק לכלי עם שטח פנים המספק מספיק מקום להצמדה וצמיחה של תאים.
דוגמאות צלוחיות שטופלו בתרבית רקמות, צלחות פטרי וצלחות מרובות בארות.
תאי השעיה
תאים אלה גדלים צפים במדיום, ולכן משטח אינו נחשב.
2. בחר את כלי התרבות התא על סמך גודל (קיבולת נפח)
תרבויות בקנה מידה קטן
עבור ניסויים בקנה מידה קטן או סינון עם תפוקה גבוהה, כלים קטנים יותר הם אידיאליים.
דוגמאות לצלחות מרובות בארות (6, 24, צלחות תרבית של 96 תאים),
צלחות פטרי, או צלוחיות T25.
תרבויות בקנה מידה גדול
אם אתה צריך לגדל כמויות גדולות של תאים, כלים גדולים יותר או ביוריאקטורים טובים יותר.
דוגמאות T75 ו-T175 תרבית תאים צלוחיות, bioreactors, או ספינר צלוחיות עבור תרביות תאי השעיה.
3. בחר את כלי התרבית התא על בסיס טיפול פני השטח
משטחים מטופלים בתרבות רקמות
הכלים מטופלים מראש כדי לקדם התקשרות תאים, מה שהופך אותם למתאימים לסוגי תאים דביקים. אלה מצופים בדרך כלל בחומרים כמו קולגן, פיברונקטין או מרכיבי מטריקס חוץ-תאי אחרים.
משטחים לא מטופלים
אידיאלי לתרביות השעיה או כאשר התאים אינם צריכים להיצמד לפני השטח. הם משמשים בדרך כלל לתאים שגדלים בחופשיות במדיום.
4. בחר את כלי התרבות התא על בסיס חומר
פוליסטירן בשימוש נפוץ ליישומי תרבית תאים סטנדרטיים. הוא ברור, מאפשר בדיקה ויזואלית קלה, ועובד היטב עבור תאים נצמדים ותאי מתלה.
פוליקרבונט או פוליפרופילן משמשים ליישומי ביו-ריאקטור מסוימים ולכלים הדורשים יותר גמישות או טיפולי משטח ספציפיים.
זכוכית המשמשת לתרבית רקמה סטנדרטית בשל עלות ושבירה, כלי זכוכית עשויים להתאים ליישומים ספציפיים או לתרביות בקנה מידה גדול.
צלוחיות
עבור תרבית תאים כללית, משתמשים בדרך כלל בצלוחיות T (T25, T75, T150). המשטח השטוח מספק אזור טוב להתקשרות וצמיחה של תאים. ניתן להשתמש בהם גם לתאים נצמדים וגם לתרביות השעיה אם התנאים המתאימים נשמרים.
צלחות פטרי
נפוץ לתרבויות בקנה מידה קטן ולניסויים הדורשים תצפית, כגון מבחני היווצרות מושבות.
צלחות רב באר
אלה שימושיים להקרנה בתפוקה גבוהה וניסויים בקנה מידה קטן יותר. צלחות עם 6, 12, 24, 48,
96, או 384 בארות זמינות, והן אידיאליות למבחנים מבוססי תאים, שחרור ציטוקינים, בדיקות תרופות ויישומים אחרים עם תפוקה גבוהה.
צלוחיות ספינר
משמש לתרביות תאי השעיה, במיוחד בנפחים גדולים יותר שבהם יש צורך בתסיסה מבוקרת כדי לשמור על צמיחת תאים וכדי למנוע התקבצות תאים.
ביוריאקטורים
עבור תרבית תרחיפים בקנה מידה גדול, ביו-ריאקטורים מאפשרים שליטה מורכבת יותר על תנאי הסביבה (לדוגמה, pH, טמפרטורה, חמצון) ומשמשים לייצור בנפח גדול, כגון בייצור ביו-פרמצבטי.
6. בחר את כלי התרבות התא על בסיס סטריליות ואוורור
עֲקָרוּת
ודא שהכלי סטרילי או עבר עיקור כדי למנוע זיהום. רוב כלי התרבות המסחריים עוברים עיקור מראש, אך תמיד בדוק את האריזה.
אוורור
חלק מהכלים, כגון צלוחיות, מגיעים עם מכסים או מסננים מאווררים כדי לאפשר חילופי אוויר תוך מניעת זיהום. זה חיוני בעת תרבית תאים בתנאים בצפיפות גבוהה.
7. בחר את כלי התרבות התא על בסיס נוחות השימוש
ניתן לאוטוקלאב לעומת חד פעמי
חלק מכלי תרבית ניתנים לביצוע חיטוי לשימוש חוזר (למשל, בקבוקי זכוכית, צלוחיות פלסטיק מסוימות), בעוד שאחרים הם חד-פעמיים וחד פעמיים (למשל, צלחות פטרי מפלסטיק, צלחות מרובות בארות).
טיפול והובלה
שקול את הקלות של העברת תאים בין כלי. לדוגמה, צלחות מרובות בארות עשויות לדרוש צלחות מיוחדות לטיפול קל עם ציוד כגון פיפטורים אוטומטיים.
8. בחר את כלי תרבית התאים על סמך נפח מצע התרבות
בחר כלי שיכול להכיל את הנפח הרצוי של מצע תרבות מבלי לבזבז משאבים. אם עובדים עם תרבית בנפח גבוה, ייתכן שיהיה צורך בצלוחיות גדולות יותר או ביו-ריאקטורים, בעוד שנפחים קטנים יותר מתאימים לצלחות או לצלחות של תרבית תאים.
9. בחר את כלי התרבות התא על סמך שיקולי עלות
חד פעמי לעומת שימוש חוזר
כלי פלסטיק חד פעמיים חסכוניים ומפחיתים את הסיכון לזיהום, אך הם עלולים להיות יקרים עבור פעולות בקנה מידה גדול. לכלי זכוכית לשימוש חוזר יש עלות מוקדמת גבוהה יותר, אך ניתן לעקר אותם ולעשות בהם שימוש חוזר מספר פעמים, מה שהופך אותם לחסכוניים יותר לשימוש ארוך טווח.
יעילות נפח
ודא שגודל הכלי מתאים כדי למנוע בזבוז של חומרים, במיוחד בעת שימוש במדיות גידול יקרות או ריאגנטים.
10. בחר את כלי תרבית התא בהתבסס על דרישות יישום ספציפיות
הַדמָיָה
אם אתה צריך לדמיין תאים תחת מיקרוסקופ, בחר כלי עם חומרים ברורים אופטית וממדים מתאימים עבור מערך ההדמיה שלך (למשל, צלחות מרובות בארות להקרנה בעלת תוכן גבוה או צלחות עם תחתית זכוכית להדמיה של תאים חיים).
תסיסה מבוקרת
עבור תרביות תאי השעיה, שקול צלוחיות ספינר או ביוריאקטורים המספקים תסיסה מבוקרת כדי לשמור על תאים תלויים באופן שווה.
מַסְקָנָה
בחירת כלי תרבית תאים נכון דורשת איזון של מספר גורמים, כולל סוג תא, סולם תרבית, תאימות חומרים וצרכים ניסויים ספציפיים. תאים נצמדים ידרשו משטחים המקדמים התקשרות, בעוד שתאי ההשעיה נהנים מנפחים גדולים יותר ומעורבול. עבור עבודה בקנה מידה קטן, צלחות מרובות באר או צלוחיות T עשויות להספיק, בעוד שתרבויות גדולות יותר עשויות לדרוש צלוחיות ספינר או ביוריאקטורים. ודא תמיד שהכלים עומדים בדרישות הסטריליות והטיפול שלך, ושקול את העלות-תועלת בהתבסס על השימוש שלך.
על ידי התחשבות בגורמים אלה, אתה יכול לבחור את הכלי האופטימלי המספק את התנאים הנכונים לתרבית התא ולמטרות הניסוי שלך.